Cum se utilizează metoda standardului extern în cromatografia de gaze?

Metoda standard externă este o tehnică de analiză cantitativă utilizată pe scară largă în cromatografia gazoasă (GC). În calitate de furnizor de cromatograf gazos, sunt bine versat în principiile și aplicațiile acestei metode. În acest blog, vă voi ghida prin procesul de utilizare a metodei standard externe în cromatografia gazoasă, de la pregătirea probei până la analiza datelor.

Înțelegerea metodei standard externe

Metoda standard externă se bazează pe principiul că aria vârfului sau înălțimea vârfului unui compus dintr-o cromatogramă este proporțională cu concentrația acestuia în probă. Pentru a utiliza această metodă, se prepară o serie de soluții standard cu concentrații cunoscute ale compusului țintă. Aceste standarde sunt apoi injectate în cromatograful de gaze și sunt măsurate zonele de vârf sau înălțimile corespunzătoare. O curbă de calibrare este construită prin reprezentarea grafică a zonelor de vârf sau a înălțimilor față de concentrațiile cunoscute ale standardelor. Odată ce curba de calibrare este stabilită, concentrația compusului țintă într-o probă necunoscută poate fi determinată prin măsurarea zonei sau înălțimii vârfului acestuia și referindu-se la curba de calibrare.

Pasul 1: Pregătirea probei și standardului

• Selectarea compușilor standard: Alegeți compuși standard puri care sunt reprezentativi pentru analiții țintă. Puritatea standardelor ar trebui să fie cât mai mare posibil pentru a asigura rezultate precise. De exemplu, dacă analizați compuși organici volatili (COV), puteți obține standarde VOC de înaltă puritate de la furnizori de încredere.
• Pregătirea soluțiilor standard: Se prepară o serie de soluții standard cu diferite concentrații. Acest lucru se poate face prin diluarea unei soluții stoc a compusului standard cu un solvent adecvat. De exemplu, dacă utilizați un solvent nepolar, cum ar fi hexanul, asigurați-vă că compusul standard este solubil în el. Concentrațiile soluțiilor standard ar trebui să acopere intervalul de concentrație așteptat al compusului țintă din probele necunoscute.
• Pregătirea probei: Procesul de pregătire a probei depinde de natura probei. Pentru probele lichide, acestea pot fi injectate direct în cromatograful de gaze după diluare corespunzătoare, dacă este necesar. Pentru probele solide, acestea ar putea fi necesare extrase cu un solvent adecvat înainte de injectare. De exemplu, dacă analizați o probă de sol pentru pesticide, puteți extrage pesticidele cu un solvent organic precum acetona.

Pasul 2: Configurarea instrumentului

• Selectarea coloanei: Alegeți o coloană adecvată pentru separarea compușilor țintă. Coloana trebuie să aibă selectivitate și rezoluție bună pentru analiții de interes. De exemplu, o coloană capilară cu o fază staționară specifică poate fi selectată pe baza polarității compușilor țintă. Dacă analizați compuși nepolari, o coloană nepolară, cum ar fi o coloană DB - 1 sau HP - 5, poate fi potrivită.
• Gaz purtător: Selectați un gaz purtător adecvat, cum ar fi heliu sau azot. Debitul gazului purtător trebuie optimizat pentru a asigura o bună separare și reproductibilitate. Debitul poate fi ajustat în funcție de dimensiunile coloanei și tipul de analiți.
• Program de temperatură: Setați programul de temperatură pentru cromatograful de gaze. Temperatura inițială, viteza de rampă și temperatura finală trebuie optimizate pentru a obține o bună separare a compușilor. De exemplu, pentru un amestec complex de compuși cu diferite puncte de fierbere, se poate utiliza un gradient de temperatură pentru a elua compușii într-un timp rezonabil.

Pasul 3: Injectarea standardelor

• Volumul de injectare: Determinați volumul de injecție adecvat pentru standarde. Volumul de injectare trebuie să fie consecvent pentru toate injecțiile pentru a asigura rezultate precise. Un volum obișnuit de injecție pentru cromatografia în gaz este în intervalul 0,1 - 10 μL.
• Tehnica de injectare: Utilizați o tehnică de injectare adecvată, cum ar fi injecția split sau splitless. Injecția split este potrivită pentru probe cu concentrații mari, în timp ce injecția splitless este mai potrivită pentru probe cu concentrații scăzute.
• Rularea Standardelor: Injectați fiecare soluție standard în cromatograful de gaze și înregistrați cromatogramele. Asigurați-vă că rulați fiecare standard de cel puțin trei ori pentru a asigura reproductibilitatea. Măsurați zonele de vârf sau înălțimile compusului țintă în fiecare cromatogramă.

Pasul 4: Construirea curbei de calibrare

• Analiza datelor: Utilizați zonele de vârf sau înălțimile standardelor și concentrațiile cunoscute corespunzătoare pentru a construi o curbă de calibrare. Puteți utiliza software-ul furnizat împreună cu cromatograful în gaz sau alt software de analiză a datelor pentru a efectua regresia liniară. Curba de calibrare ar trebui să aibă o relație liniară bună, de obicei cu un coeficient de corelație (R²) apropiat de 1.
• Ecuația curbei de calibrare: Odată construită curba de calibrare, obțineți ecuația dreptei sub forma y = mx + b, unde y este aria sau înălțimea vârfului, x este concentrația, m este panta și b este intercepta.

Pasul 5: Analizarea mostrelor necunoscute

• Injectarea probelor necunoscute: Injectați probele necunoscute în cromatograful de gaze utilizând același volum și tehnică de injecție ca pentru standarde.
• Măsurarea zonelor de vârf sau a înălțimilor: Măsurați zonele de vârf sau înălțimile compusului țintă în cromatogramele probelor necunoscute.
• Determinarea concentrației: Utilizați ecuația curbei de calibrare pentru a calcula concentrația compusului țintă din probele necunoscute. Înlocuiți aria sau înălțimea vârfului măsurat în ecuație și rezolvați concentrația.

Pasul 6: Controlul calității

• Repetabilitate: Pentru a asigura fiabilitatea rezultatelor, rulați probe de control al calității la intervale regulate. Aceste probe ar trebui să aibă concentrații cunoscute și să fie analizate în același mod ca probele necunoscute. Rezultatele probelor de control al calității trebuie să se încadreze într-un interval acceptabil.
• Teste de recuperare: Efectuați teste de recuperare prin adăugarea unor cantități cunoscute de compus țintă în probe. Calculați rata de recuperare, care ar trebui să fie aproape de 100%. Dacă rata de recuperare este în afara intervalului acceptabil, pot apărea probleme cu pregătirea probei sau metoda de analiză.

Produsele noastre pentru cromatografe de gaze

În calitate de furnizor de gaz cromatograf, oferim o gamă largă deEchipamente de cromatografiepentru a vă satisface nevoile analitice. NoastreCromatograf gazos GC - 06Eeste un instrument de înaltă performanță, cu caracteristici avansate, cum ar fi controlul precis al temperaturii și detectoare de înaltă sensibilitate. Este potrivit pentru o varietate de aplicații, inclusiv analiza mediului, siguranța alimentară și analiza farmaceutică.

NoastreAnalizor GCeste un alt produs excelent care oferă rezultate precise și de încredere. Este ușor de operat și întreținut, ceea ce îl face o alegere populară printre utilizatori.

Contactați-ne pentru achiziție

Dacă sunteți interesat de produsele noastre pentru cromatografia de gaze și doriți să aflați mai multe despre cum să utilizați metoda standard externă în combinație cu instrumentele noastre sau dacă aveți alte întrebări cu privire la analiza cromatografiei în gaze, vă rugăm să nu ezitați să ne contactați pentru o consultație de achiziție. Echipa noastră de experți este pregătită să vă ajute în găsirea celei mai potrivite soluții pentru nevoile dumneavoastră analitice.

Referințe

• McNair, HM și Miller, JM (1997). Cromatografia gazoasă de bază. Wiley - Interștiință.
• Poole, CF (2003). Esența cromatografiei. Elsevier.